凝膠滲透色譜儀（GPC）是一種基于分子體積差異實現(xiàn)分離的分析儀器，主要用于高分子物質(zhì)的分子量及其分布測定。其核心原理是利用多孔性凝膠作為固定相，當高分子溶液流經(jīng)色譜柱時，分子體積大于凝膠孔徑的組分無法進入孔隙，直接通過色譜柱間隙快速流出；中等體積分子部分進入孔隙產(chǎn)生滯留效應(yīng)；最小分子則完q滲透到所有孔隙中導(dǎo)致最長保留時間。這一過程遵循分子流體力學體積與保留時間的反比關(guān)系，從而實現(xiàn)分子量分級。
該儀器主要由泵系統(tǒng)、進樣器、色譜柱和檢測系統(tǒng)組成。泵系統(tǒng)維持恒定流速，壓力上限可達600bar；檢測系統(tǒng)支持示差折光、紫外、光散射等多類型檢測器，可測定相對分子量、絕對分子量等參數(shù)。主流設(shè)備如東曹HLC-8420GPC、Polymer Char高溫GPC等均實現(xiàn)自動化操作與高精度檢測，部分型號柱溫可達250℃，支持高溫溶解后降溫析出樣品的測試。
1、柱相關(guān)問題
柱堵塞
原因：樣品中的雜質(zhì)、溶劑殘留，或流動相中的物質(zhì)在柱內(nèi)析出等。
解決方法：定期進行柱的清洗和保養(yǎng)；選擇合適的柱材料和適當?shù)纳V條件，如過濾樣品、使用合適的流動相等；對于嚴重堵塞的柱子，可能需要更換新的色譜柱。
柱老化或損壞
原因：長時間使用、樣品超載、流動相pH值不合適、柱溫過高或過低等因素導(dǎo)致柱效降低、固定相流失等。
解決方法：根據(jù)柱子的使用壽命和使用情況，適時更換新的色譜柱；控制進樣量，避免柱超載；調(diào)節(jié)流動相pH值在合適范圍，一般為3-7.5；保持柱溫穩(wěn)定，避免溫度過高或過低對柱子造成損害。
保留時間變化
原因：流速不穩(wěn)定、溫度波動、色譜柱老化、流動相組成改變、等度與梯度間未能充分平衡等。
解決方法：檢查流速設(shè)置是否正確，必要時進行流速校正；確保柱溫恒定，可配置恒溫箱來控制溫度；用合適的流動相充分平衡柱子，使其達到穩(wěn)定狀態(tài)；保持流動相組成的一致性，避免流速波動。
2、檢測器問題
噪聲問題
原因：儀器連接和電源線問題、外部電磁干擾、檢測器光源不穩(wěn)定、流動相中有氣泡、柱子或流路污染等。
解決方法：檢查儀器的連接和電源線是否完好，排除外部電磁干擾的可能性；若噪聲信號仍然存在，可考慮更換或維修儀器；對于檢測器光源不穩(wěn)定的情況，及時更換光源；對流動相進行脫氣處理，并在柱子后端加背壓；清洗柱子和流路，確保樣品純凈。
漂移問題
原因：儀器不穩(wěn)定、色譜柱異常、檢測器故障等。
解決方法：首先檢查儀器是否穩(wěn)定，排除儀器本身的問題；同時檢查色譜柱是否正常，如有必要，可以更換新的色譜柱；若懷疑檢測器故障，可聯(lián)系廠家進行維修或校準。
靈敏度低
原因：光源老化、流動相配比不當、檢測器設(shè)置不正確等。
解決方法：檢查光源是否老化，及時更換；調(diào)整流動相配比至合適范圍；優(yōu)化檢測器設(shè)置，如調(diào)整檢測波長、增益等參數(shù)。
3、進樣系統(tǒng)問題
峰面積重復(fù)性差
原因：進樣量不準確、樣品降解、檢測器響應(yīng)不穩(wěn)定等。
解決方法：校準進樣系統(tǒng)，確保進樣量的準確性；檢查樣品的穩(wěn)定性，如有必要，采取冷藏、避光等措施防止樣品降解；檢查檢測器響應(yīng)是否穩(wěn)定，若不穩(wěn)定，需進行維修或更換。
出現(xiàn)肩峰
原因：樣品體積過大、樣品溶劑過強、柱塌陷或形成短路通道、柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效、進樣器損壞等。
解決方法：控制樣品體積，使總的樣品體積小于第一峰的15%；更換較弱的樣品溶劑，降低其洗脫能力；若柱塌陷或形成短路通道，需更換新柱子，并采用較弱腐蝕性條件；更換燒結(jié)不銹鋼部件，加在線過濾器過濾樣品；如進樣器損壞，及時更換進樣器轉(zhuǎn)子。
4、數(shù)據(jù)處理問題
鬼峰
原因：進樣閥殘余峰、樣品中未知物、柱未平衡、水污染（反相）等。
解決方法：每次使用后用強溶劑清洗進樣閥，改進閥和樣品的清洗方法；對樣品進行預(yù)處理，去除其中的未知物；用流動相作樣品溶劑重新平衡柱，尤其是離子對色譜；檢查水質(zhì)量，確保使用HPLC級的水。
基線不穩(wěn)定
原因：檢測器、泵或流動相的問題，如檢測器光源不穩(wěn)定、泵有脈動、流動相有氣泡等。
解決方法：更換光源、維修泵、排除流動相中的氣泡等；同時檢查軟件是否正常運行，數(shù)據(jù)采集卡是否損壞，通訊線路是否暢通，如有故障進行相應(yīng)的重啟、更換或檢查修復(fù)操作。
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